液氮罐的使用與保管
  一、使用前的檢查
液氮罐在充填液氮之前，首先要檢查外殼有無凹陷，真空排氣口是否完好。若被碰壞，真空度則會降低，嚴重時進氣不能保溫，這樣罐上部會結霜，液氮損耗大，失去繼續使用的價值。其次，檢查罐的內部，若有異物，必須取出，以防內膽被腐蝕。
    二、液氮的充填
    填充液氮時要小心謹慎。對于新罐或處于干燥狀態的罐一定要緩慢填充并進行預冷，以防降溫太快損壞內膽，減少使用年限。充填液氮時不要將液氮倒在真空排氣口上，以免造成真空度下降。蓋塞是用絕熱材料制造的，既能防止液氮蒸發，也能起到固定提筒的作用，所以開關時要盡量減少磨損，以延長使用壽命。
    三、使用過程中的檢查
    使用過程中要經常檢查?？梢杂醚塾^測也可以用手觸摸外殼，若發現外表掛霜，應停止使用；特別是頸管內壁附霜結冰時不宜用小刀去刮，以防頸管內壁受到破壞，造成真空不良，而是應將液氮取出，讓其自然融化。
    四、液氮罐的放置
    液氮罐要存放在通風良好的陰涼處，不要在太陽光下直曬。由于其制造精密及其固有特性，無論在使用或存放時，液氮罐均不準傾斜、橫放、倒置、堆壓、相互撞擊或與其他物件碰撞，要做到輕拿輕放并始終保持直立。
    五、液氮罐的清洗
    液氮罐閑置不用時，要用清水沖洗干凈，將水排凈，用鼓風機吹干，常溫下放置待用。液氮罐內的液氮揮發完后，所剩遺漏物質(如冷凍精子)很快融化，變成液態物質而附在內膽上，會對鋁合金的內膽造成腐蝕，若形成空洞，液氮罐就會報廢，因此液氮罐內液氮耗盡后對罐子進行刷洗是十分必要的。具體的刷洗辦法如下：首先把液氮罐內提筒取出，液氮移出，放置2—3天，待罐內溫度上升到0℃左右，再倒人30℃左右的溫水，用布擦洗。若發現個別融化物質粘在內膽底上，一定要細心洗刷干凈。然后再用清水沖洗數次，之后倒置液氮罐，放在室內安全不宜翻倒處，自然風干，或如前所述用鼓風機風干。注意在整個刷洗過程中，動作要輕慢，倒人水的溫度不可超過40℃，總重不要超過2kg為宜。
    六、液氮罐的安全運輸
液氮罐在運輸過程中必須裝在木架內墊好軟墊，并固定好。罐與罐之間要用填充物隔開，防止顛簸撞擊，嚴防傾倒。裝卸車時要嚴防液氮罐碰擊，更不能在地上隨意拖拉，以免減少液氮罐的使用壽命。
液氮罐是高度真空的冷藏器。在使用和保養液氮罐時必須掌握以下幾點：
1、 液氮罐在使用前，應先注入少量液氮使之預冷，在罐內溫度達到液氮溫度時，充入液氮直至滿罐。液氮罐要輕拿輕放，防止碰撞擠壓，移動時不可在地面拖拉，要抬起來。平時要存放在干燥、通風良好的房間，防止潮濕。
2、 在保存冷凍精液時，罐內要經常保持一定容量的液氮，以凍精完全浸泡在液氮中為宜。液氮量的測量有兩種方法：
2.1 木尺測量法
　　取一根直徑5cm、長80cm的木棍，去皮后涂上黑色，然后自一端開始每隔5cm設一刻度，測量時，將零刻度朝下，自液氮罐口插到罐底，經5～10S取出，結霜的長度即為罐內液氮容量，如罐內液氮容量不足總容量的1/3時，應補充液氮。
2.2 測重法
　　先稱出空罐的重量，再稱出注滿液氮時的重量，然后減去空罐的重量，即得罐內液氮的總重量，以后每隔3～5d稱一次液氮罐的重量，當罐內液氮的重量低于液氮總重量的1/3時，即應充氮。
3、 要隨時檢查頸塞和頸塞小溝，及時除掉頸塞上的結冰，頸塞上不能放置塑料布等物質，增加封閉性，保證液氮罐的使用性能。當發現液氮消耗速度過快或在液氮罐頸口的周圍附有水珠、出現白霜時，即表示罐的絕緣性能失調，不能保存液氮。
4、 液氮罐內放置標本要做好標記，取放時要穩、準、快。
5、 液氮罐的內腔每年要清洗一次，以防腐蝕罐壁，清洗前要將罐內的液氮放干，并在室內停放2～3d預熱到室溫后，用中性洗衣粉刷洗，再用清水沖洗干凈控干，清洗液和清水的溫度不宜超過40℃，防止過熱影響罐的性能。
6、 液氮罐要盡量減少運輸和開蓋的次數。如需運輸，一定要用繩索固定在車箱上，保持直立，嚴防摔撞、倒覆、橫臥，盡量防止劇烈震動。
液氮的安全使用
液氮（Liquid nitrogen）是一種特殊的產業制成品，廣泛應用于精密儀表制造和醫藥、食品等工農業生產、日常生活，主要是冷凍貯存媒介。液氮來源于空氣，空氣中所含主要氣體成分為氧氣和氮氣，其中，氮氣約占空氣的78．09％。液氮即為液化的氮氣。
　　1、液氮特性：液氮由于是由氮氣壓縮冷卻的液體，其理化性質比較特殊。主要特性如下：
　　①超低溫性：液氮的沸點為－195．8，液氮氣化時每公斤可吸熱48大卡。
　　②液氮是無色、無臭、無毒的液體。
　　 ③液氮的滲透性很弱，但當人體皮膚接觸液氮時會受到嚴重凍傷。
　　 ④膨脹性：液氮是由空氣壓縮冷卻制成，其氣化時能恢復為氮氣。據測每一立升液氮氣化，溫度上升15℃，體積膨脹約為180倍。
　?、葜舷⑿裕旱獨獗旧聿荒苤率谷酥舷ⅲ谝欢臻g內，假如氮氣過多而隔盡氧氣，操縱者也會引起窒息。據測定，10公斤液氮在10立方米的室內瞬間蒸發，可使空間氧氣忽然降到13％，造成空間缺氧。在此條件下，就能引起人的窒息乃至死亡。
　　2、液氮貯存：液氮貯存種類一般可分為貯存罐、運輸罐兩種。貯存罐主要用于室內液氮的靜置貯存，不宜在工作狀態下作遠間隔運輸使用；為了滿足運輸條件，運輸罐主要有專項防震設計，除靜置貯存外，還可在充裝液氮狀態下，作運輸使用，但應避免劇烈的碰撞和震動；另外，在短時間、短間隔內使用少量液氮時，也可以臨時使用保溫瓶（杯）等用具存放，但在用保溫瓶（杯）等物貯存時，必須在瓶塞邊沿切開一條牙簽樣大小的小溝，以便氮氣的安全排出。
3、液氮的安全使用：正常情況下，液氮貯存在密封式罐體時，要留意將液氮罐口保存一定縫隙，否則液氮氣化時氣體無法及時排出，極易造成爆炸事故。一般液氮罐的蓋塞都留有一定的縫隙，在使用時千萬不要人為將其堵塞。
　 ⑴液氮使用留意事項： ①液氮是低溫制品，在使用過程中要防止凍傷。 ②在液氮中操縱及存取冷凍物品時速度要快，留意輕拿輕放，以免物品解凍，造成不必要的損失。 ③在使用和貯存液氮的房間內，要保持透風良好，以避免空間缺氧，造成職員窒息。 ④由于液氮不具有殺菌性，故接觸液氮的用具要留意消毒。 ⑤液氮罐在運輸過程中一定要固定好，以防震動和倒翻。 ⑥液氮罐長期貯存物品時，要留意及時補充液氮。
　　⑵容器的使用維護: ①在使用過程中，天天都應隨時檢查罐體的使用情況，發現罐體瓶蓋上或上部有水珠和結霜情況，說明罐體質量有題目，應立即停止使用；在罐體無水珠或結霜現象時，可以用手觸摸外殼 ，若感覺上部冷，下部熱，這也說明罐體質量有一定的題目，即液氮日增損較大，應留意觀察，防止液氮耗損，最好停止使用；同時在日常使用過程中，還要參照相關壓力容器安全技術監察規程要求，定期對液氮罐及安全設施儀表附件進行檢測校驗，確保其安全完好。 ②使用前要認真檢查容器相關安全儀表和附件，當儀表、附件處于完好的正常狀態下，才能正確把握和調整其所需壓力和容量； 若發現外表掛霜，應立即停止使用，及時檢驗檢測和維修。 ③液氮罐在充填液氮之前，首先要檢查外殼有無凹陷，真空排氣口是否完好；若被碰壞，真空度則會降低，嚴重時進氣不能保溫，這樣罐體上部就會結霜，液氮損耗大，會失往繼續使用的價值；充填液氮時更不能將液氮倒在真空排氣口，以免造成真空度下降；同時，充填液氮前罐內要有少量液氮保持預冷狀態。 ④液氮罐要存放在透風良好的陰涼處，不要在太陽光下暴曬。由于其制造精密及固有的特性，無論在使用或存放時，嚴禁液氮罐傾斜、橫放、顛倒、堆壓、相互撞擊或與其他物件碰撞，要始終保持罐體豎立。 ⑤用于長期貯存時，則需要定期補充液氮，補充時一般應在液氮剩余量為總容量的三分之一為宜。 ⑥放進或取出冷凍物品時，要盡量使罐口打開時間短，以減少液氮消耗，也不要把提筒完全提出來。 ⑦嚴禁在容器蓋上放置物體和密封頸口。 ⑧嚴禁用硬物清除頸管內的凍霜，以免損傷頸管。 ⑨液氮罐只用于艷服液氮，不答應艷服其他液體或混存。
　　⑶運輸: ①運輸時應使用海棉或其它軟墊物品對液氮罐加以固定，預防翻倒。 ②正確選用運輸罐(YDS-XB)，禁止使用貯存罐作運輸罐用。

液氮罐在生物學實驗中的應用
 
一、在細胞培養過程中的使用
    細胞培養的一般過程，主要包括準備、取材、培養和凍存復蘇4步。為保存細胞，特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株，要將細胞凍存。凍存的溫度一般用一196℃液氮溫度，將細胞收集至凍存管中加入含保護劑(一般為二甲基亞砜或甘油)的培養基，以一定的冷卻速度凍存，最終保存于液氮中。在極低的溫度下，細胞保存的時間幾乎是無限的。
二、胚胎冷凍保存技術
    胚胎冷凍保存技術是指在低溫條件下利用低溫保護劑保存胚胎的一門技術。這一技術是20世紀后半葉隨著人工授精技術廣泛應用而產生的，目前已成為了現代生命科學研究必備的手段之一。動物胚胎的冷凍保存原理就是因為低溫降低了胚胎內的變質反應速度，溫度越低，胚胎保存時間就越長。
    目前已研究出多種胚胎冷凍保存方法，包括慢速冷凍法、快速冷凍法、一步冷凍法、直接移植冷凍法和玻璃化冷凍法等。其中玻璃化冷凍法的步驟如下：
    ①將胚胎在室溫下放人25％玻璃化溶液(VS液)中預處理15min；
    ②將預處理后的胚胎放在高濃度(75％一90％)的VS液中保存20—40min；
    ③將經過兩步抗凍劑處理的胚胎直接投入液氮中保存。