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人外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞(CTC)檢測(cè)技術(shù)在臨床腫瘤診斷和治療中的作用
 
有關(guān)循環(huán)腫瘤細(xì)胞的理論已有很長(zhǎng)時(shí)間.腫瘤轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)的過程均是一個(gè)循環(huán)腫瘤細(xì)胞定植生長(zhǎng)的級(jí)連放大的瀑布反應(yīng).目前腫瘤的發(fā)現(xiàn)和診斷仍高度依賴于影像學(xué)及腫瘤特異性血清標(biāo)志物的方法,不能及時(shí)發(fā)現(xiàn)腫瘤的轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā).基于腫瘤細(xì)胞播散理論,檢測(cè)循環(huán)腫瘤細(xì)胞可更早期有效發(fā)現(xiàn)腫瘤的早期轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā).本文對(duì)文獻(xiàn)報(bào)道的檢測(cè)循環(huán)腫瘤細(xì)胞在臨床腫瘤診斷和治療中的作用進(jìn)行了總結(jié),并與目前經(jīng)典的標(biāo)志物和影像學(xué)進(jìn)行了比較.
什么是CTC
CTC指自發(fā)或因診療操作進(jìn)入外周血循環(huán)的腫瘤細(xì)胞。腫瘤病人,隨著腫瘤在病人體內(nèi)的不斷生長(zhǎng),部分腫瘤細(xì)胞會(huì)因多種機(jī)制脫離腫瘤母體而進(jìn)入血液循環(huán)。這些細(xì)胞可能在短期內(nèi)死亡,也可能造成遠(yuǎn)處臟器的轉(zhuǎn)移。
肺癌患者檢查CTC的意義?
目前對(duì)腫瘤的臨床診斷方法多局限于影像學(xué)檢查,如胸片、CTB超等,醫(yī)生只有在影像上發(fā)現(xiàn)有新生物才會(huì)考慮存在腫瘤,而已確診為肺癌的病人,醫(yī)生也只能通過影像學(xué)檢查,觀察是否有其他部位的腫瘤或已發(fā)現(xiàn)腫瘤體積是否發(fā)生改變,以此來推斷腫瘤是治愈還是在進(jìn)展。而影像學(xué)表現(xiàn)出來的結(jié)果往往已經(jīng)是即存事實(shí),病人多已錯(cuò)過了最佳的治療時(shí)期或已接受了過度的治療。
CTC的最大優(yōu)點(diǎn)就是及時(shí)反映了病人所患腫瘤的狀態(tài),其早于影像學(xué)表現(xiàn),醫(yī)生可通過CTC結(jié)果預(yù)知患者的預(yù)后、是否應(yīng)改變治療方案、治療效果及病人是否復(fù)發(fā)等。
臨床上CTC可以指導(dǎo)治療方案嗎?
當(dāng)然可以,目前我院胸外科根據(jù)病人術(shù)、前術(shù)后CTC的變化以及化療前、后CTC的變化及時(shí)判定治療效果和治療方法的敏感性,較影像學(xué)改變更快捷地及時(shí)調(diào)整治療方案。一些病人在外院診斷晚期,不能手術(shù)治療,但經(jīng)我院CTC檢測(cè)證實(shí)腫瘤無轉(zhuǎn)移傾向,可以手術(shù)治療,目前這些病人手術(shù)后均恢復(fù)順利,并未發(fā)現(xiàn)腫瘤晚期的表現(xiàn);以往我們認(rèn)為手術(shù)可能已徹底切除的腫瘤,術(shù)后無化療計(jì)劃,但經(jīng)CTC檢測(cè)可能發(fā)現(xiàn)患者有腫瘤轉(zhuǎn)移傾向,即刻召回病人化療;對(duì)化療中的病人,以往經(jīng)驗(yàn)可能認(rèn)為化療有效,但CTC檢測(cè)證實(shí)腫瘤仍在活動(dòng),結(jié)合化療藥敏檢查等,即刻改變化療方案。
總之,CTC這一高新技術(shù)剛在我院(也即我國(guó))開展,其真實(shí)的臨床意義尚在探索中,就我們目前所能了解的結(jié)果,認(rèn)為:基于我科全面的手術(shù)技術(shù)、CTC檢測(cè)、化療藥敏等的個(gè)體化治療(而非以往的統(tǒng)計(jì)學(xué)概率治療)對(duì)于病人及時(shí)選擇有效治療、判定預(yù)后有難以估量的臨床價(jià)值。
美國(guó)腫瘤協(xié)會(huì)于2006 年發(fā)表的年度報(bào)告指出,目前全世界范圍內(nèi)每3 人中就有1 人在其一生中會(huì)患有某種腫瘤,而且腫瘤發(fā)病率在發(fā)展中國(guó)家隨著污染程度的增加,患病幾率還會(huì)高于1/3 的比例。現(xiàn)今全世界用于腫瘤治療與防治的費(fèi)用每年以16.5% 的比例遞增。僅用于乳腺癌,結(jié)直腸癌及前列腺癌(還不包括發(fā)病率最高的肺癌)的投資,目前世界范圍內(nèi)已達(dá)每年92 億美元。
目前全世界用于腫瘤診斷的方法可歸為三大類:病理學(xué)(活檢切片);影像學(xué)(超聲,X光,CT, PET 等)和血清學(xué)(血清腫瘤相關(guān)蛋白,如CA-125, CA-199, CEA 等),但所有這些方法都有不可避免的缺點(diǎn),例如靈敏性及特異性差,過于依賴醫(yī)生判斷的主觀性等。因此目前臨床急需一種能夠?yàn)獒t(yī)生及病人提供準(zhǔn)確,快速的腫瘤檢測(cè)手段。經(jīng)過長(zhǎng)時(shí)間的大量研究,美國(guó)FDA 認(rèn)證的人外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞(Circulating Tumor Cell, CTC)檢測(cè)目前已被公認(rèn)為最好及最可觀的檢測(cè)手段之一。
目前已有越來越多的國(guó)內(nèi)外醫(yī)生開始應(yīng)用此技術(shù)作為腫瘤檢查的重要輔助手段。不僅于此,CTC 檢測(cè)也被公認(rèn)為是目前國(guó)外新近流行的腫瘤治療方法-即阻斷腫瘤細(xì)胞入血轉(zhuǎn)移的唯一有效檢測(cè)指標(biāo)。除了上述CTC可作為腫瘤檢測(cè)手段外,CTC還可成功應(yīng)用于以下一系列其它方面的用途:(1)個(gè)體化治療的體外腫瘤藥物篩選;(2)體內(nèi)化療藥物藥效的快速評(píng)估: 相對(duì)于每12周一查的CT診斷,CTC在第1-2周即可顯示藥效結(jié)果,這一點(diǎn)對(duì)臨床醫(yī)生和病人尤為重要;(3) 根據(jù)CTC數(shù)目,判斷病人愈后狀況及存活時(shí)間;(4)腫瘤病人復(fù)發(fā)的監(jiān)測(cè)與及時(shí)診斷;及(5)正常人群體檢普查以利于盡可能的腫瘤早期診斷。除了應(yīng)用于臨床外,CTC 亦可應(yīng)用于眾多藥廠和科研機(jī)構(gòu)的基礎(chǔ)研究,包括尋找新的腫瘤標(biāo)識(shí)物以及開發(fā)新的抗腫瘤藥物等。
目前美國(guó)FDA已于2004年認(rèn)證了美國(guó)上市公司Immunicon/VeridexCTC檢測(cè)技術(shù)及其臨床應(yīng)用。該公司的銷售額從2004 年的1百萬美元猛增到2007年的2000萬美元,2008 年銷售額預(yù)計(jì)為3800萬美元。可見其市場(chǎng)接受程度之迅猛。
然而仔細(xì)分析Immunicon/Veridex的檢測(cè)技術(shù),不難發(fā)現(xiàn)其顯而易見的缺陷。該技術(shù)分離檢測(cè)腫瘤細(xì)胞主要是基于腫瘤細(xì)胞表面的一種特定標(biāo)識(shí)物。但眾所周知,此腫瘤細(xì)胞表面標(biāo)識(shí)物隨著腫瘤細(xì)胞病理性生長(zhǎng)及腫瘤細(xì)胞的入血而異常表達(dá)。而且,此一特定標(biāo)識(shí)物在細(xì)胞表面的表達(dá)量也因腫瘤不同而差異極大,包擴(kuò)高表達(dá)與不表達(dá)。所有這些使得該技術(shù)在很多情況下捕獲不到腫瘤細(xì)胞,從而限制了該技術(shù)的廣泛普及與應(yīng)用。最近臨床上已有越來越多這方面的報(bào)道。
針對(duì)Immunicon/Veridex檢測(cè)技術(shù)的致命缺點(diǎn),我們采用了全新的思維方式,從而發(fā)明了一整套從根本上不同于Immunicon/VeridexCTC檢測(cè)方法。其基本原理就是應(yīng)用特殊手段去除外周血中的絕大多數(shù)白細(xì)胞,從而將血中剩余的稀有細(xì)胞包括CTC進(jìn)行富集及鑒別。與Immunicon/Veridex的方法相比,我們的優(yōu)勢(shì)是明顯的:(1)大量的實(shí)驗(yàn)室及臨床實(shí)驗(yàn)證明我們的方法流程簡(jiǎn)便,快捷,高效,即可用于手工操作,亦可使其自動(dòng)化,能滿足人們?cè)诓煌瑱n次的需求;(2)與Immunicon/Veridex只能局限應(yīng)用于某些腫瘤不同,我們的技術(shù)不基于腫瘤細(xì)胞表面標(biāo)識(shí)物,同一技術(shù)可提取并鑒定所有實(shí)體腫瘤的入血細(xì)胞,這一點(diǎn)已為大量實(shí)驗(yàn)所證明;(3)獲取的腫瘤細(xì)胞具有很好的細(xì)胞形態(tài),便于識(shí)別。這一點(diǎn)是Immunicon/Veridex 所不能比擬的,這也正是該公司的產(chǎn)品至今還不能為國(guó)外廣大病理科醫(yī)生所接受主要原因之一;(4)不受采血體積的限制:Immunicon/Veridex的最少工作血量為7毫升,對(duì)于很多化療病人而言這是不可行的。我們的大量臨床經(jīng)驗(yàn)顯示約近1/3的腫瘤化療病人每次可采血量只有2-4 毫升,這極大限制了Immunicon/Veridex技術(shù)的廣泛應(yīng)用。然而我們的方法可適于任何體積的血樣,不存在任何最小或最大血量的限制;(5)與Immunicon/Veridex的方法相比,其只能進(jìn)行簡(jiǎn)單的CTC計(jì)數(shù)。而我們的方法則在CTC計(jì)數(shù)的基礎(chǔ)上,還可對(duì)同一份標(biāo)本進(jìn)行其它一系列的檢查,如血清學(xué)檢查,白細(xì)胞基因組的測(cè)定,腫瘤細(xì)胞培養(yǎng),流式細(xì)胞儀分析(flowcytometry, 原位熒光雜交(FISH)及PCR分析等;(6)除了應(yīng)用于CTC,本技術(shù)亦可用于干細(xì)胞,血管內(nèi)皮細(xì)胞及血中稀有淋巴細(xì)胞的提取與研究。
 

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